关闭刘宗印大夫刘宗印大夫今天收录于话题#减肥#不孕症1#辅助生殖1#生殖1个内容临床上,我最近遇到很多不孕症的患者,她们的不孕其实是肥胖导致的,肥胖会导致不孕,小伙伴们知道吗?肥胖,先看看肥胖有多可怕
由于工作需要,我从八月份开始负责宝鸡市生殖医学中心工作,宝鸡市生殖医学中心是宝鸡市重点医学专科,是国家、省卫生健康委同意批准设立的宝鸡地区唯一的人类辅助技术机构,承担着宝鸡地区八县四区和周边省市地区不
这段时间以来,被居家隔离的人很焦急,有的人说都快闷死在家里了,就等隔离解除令一下,马上就会这样飞奔出去,要把没有吃的火锅补回来,要把没有逛的商场逛美。然而,这个新冠状病毒病毒远远超乎大家的想象。第一,这个病毒是新病毒,我们对之只是短短20多天的研究,研究发现,它是一个很诡异的病毒。首先,它的潜伏期超过24天,有的人被感染后到24天才发病,所以这就是为什么救治好了的病人还要再隔离14天的原因。其次,这个病毒对每个人的伤害不一样,不是都会发热和咳嗽,有40%的病人没有这些表现,同时又有20%的病人没有肺上典型的表现,拍CT看不出来。这种人携带病毒,和没事人一样。这就给我们带来了很大的救治困难,这就会救治和防控带来巨大的困难。第二,这个病毒是新病毒,我们检测的手段还很有限,大家知道的核酸检测阳性率才30%,因为对于病毒的检测手段还不够高,因此对于筛查带来了巨大的困难,有的人CT也没有典型的表现,但是就是携带有病毒,就会传染,也就是有的病人没有办法检查出来。第三,我们人口众多,加之复工在即,很多企业为了生存抓紧复工,其中复工的人里面就有这些长潜伏期的、带毒不发病的。这类人成了新的传染源。目前至少发生10例这种事件。所以,虽然防疫工作取得了阶段性 胜利,但是离完全彻底的胜利还有一段时间,有的人问我,还要多久,用钟南山院士的话说,可能还需要几个月。因此,我们现在不能掉以轻心,不能让这个疫情死灰复燃。我们需要排除麻痹大意的思想,要对这个病毒带来的疫情有个充分的认识,对于防控形势的严峻性做好思想准备,要做好打一场彻底的歼灭战、持久战的准备。其次,不要好了伤疤忘了疼,我们现在是旧伤未好不要再添新伤。做好个人防护,戴口罩,勤洗手,少聚集。革命尚未成功,同志们仍需努力!
读懂复工复产令,迎接决战的胜利刘宗印大夫刘宗印大夫昨天今天,很多地方按照中央部署,下达了复工令。各行各业,按照行业特点有序复工,但是,复工令可能被一部分人误读了,认为疫情已经接近尾声,如同七日之殇一样,已经过了三个七日。其实不然,防疫抗疫还远远没有结束,我们面临的形势非常严峻,如果不能充分清醒的认识目前防控抗疫的,壮士的血就白流了,而且会掀起更大的死灰复燃。那么这场疫情什么时候才能结束呢?在2月17日下午,钟南山院士表示:根据现有数学模型和政府采取的有力措施,预计在2月中下旬出现峰值,4月左右全国疫情会平稳。大家看看,根据这场新型的病毒,我们保守估计现在还在峰顶,还在最危险的胶着时刻,而不是大家想象的那样。借用我昨天对这个病毒的分析:这个病毒很新,我们研究还不够深入,这个病毒很厉害,传播感染能力特别强,这个病毒很诡异,我们现在没有手段能够准确把它揪出来,而且出现很多不发病的携带病毒的。重复如下:这个新冠状病毒病毒远远超乎大家的想象。第一,这个病毒是新病毒,我们对之只是短短20多天的研究,研究发现,它是一个很诡异的病毒。首先,它的潜伏期超过24天,有的人被感染后到24天才发病,所以这就是为什么救治好了的病人还要再隔离14天的原因。其次,这个病毒对每个人的伤害不一样,不是都会发热和咳嗽,有40%的病人没有这些表现,同时又有20%的病人没有肺上典型的表现,拍CT看不出来。这种人携带病毒,和没事人一样。这就给我们带来了很大的救治困难,这就会救治和防控带来巨大的困难。第二,这个病毒是新病毒,我们检测的手段还很有限,大家知道的核酸检测阳性率才30%,因为对于病毒的检测手段还不够高,因此对于筛查带来了巨大的困难,有的人CT也没有典型的表现,但是就是携带有病毒,就会传染,也就是有的病人没有办法检查出来。第三,我们人口众多,加之复工在即,很多企业为了生存抓紧复工,其中复工的人里面就有这些长潜伏期的、带毒不发病的。这类人成了新的传染源。今天有个新的情况,也就是经过病毒学家等研究发现,发生在武汉的新冠状病毒和发生在美国等地的病毒还不是相同的病毒,也就是说他们是兄弟,那么罪魁祸首的病毒,也就是新冠状病毒的父亲是谁?从哪里开始传染的还不知道。也就是说这个病毒的儿子一代演绎了这次灾难,而这个儿子现在可能也开始有儿子了,所以会出现不发病的携带传染者,这一点来说可能现在已经发生了一些变异,从儿子到孙子,不一样了,所以疫情出现了多样性,这给我们救治带来了巨大的困难和挑战,这就是为什么病毒开始的潜伏期是1-14天,现在变成了1-24天,这个潜伏期会不会由于病毒再继续变异,潜伏期会不会发生变化,目前还需要进一步的研究。也就是说,狡猾的新冠状病毒像白骨精一样开始变化多端,我们可能和唐僧一样,还没有练就成孙悟空的火眼金睛。因为新冠状病毒是RNA单链氨基酸,它不像DNA双链氨基酸那么固定不变,它可以多一截或者少一截,少一截的可能毒性就差一点,多出一截的可能毒性强一些。现在的形势就如果解放战争胜利了,敌人从明处躲到了暗处,变成了特务,偷偷的搞破坏,还在蠢蠢欲动展开大反攻。这就是当前的形势。请我们一定要高度重视这个形势,不能被胜利冲昏了头脑,现在我们需要更加保持清醒的头脑,加上需要复工复产,人员开始流动,这给我们彻底歼灭新冠状病毒带来了巨大的挑战。所以,要认真领会复工复产、有序开展工作,并对疫情的筛查工作做的更细更透彻。想一想,国家花费了多大的精力和财力,来打这场没有硝烟的战争,而以美国为首的亡我中华之虎狼之心恶犬们虎视眈眈,准备落井下石趁机坐收渔利。如果我们没有清醒的认识,势必会中了敌人的圈套,不法分子乘机而入,这场疫情把外国的间谍们吓得屁滚尿流,纷纷逃离,同时也暴露了帝国主义亡我之心的龌龊勾当。现在路上已经有很多车了,街上的人流也慢慢增多,如果疫情一旦大面积交叉感染,按国家的隔离要求,就是把所有的医院都腾空,也接不了多少患者。请问市、区有哪个医院有1000张标间床位呢,不会有火神山,雷神山的。自己好好算算。请大家尽量克制,不要外出,不要让前段时间大家的努力功亏一篑。否则到时候我们会比武汉还惨,因为不仅没病床,还没有医生,更没有防护物资。也买不了口罩,酒精,消毒液。也得不到大幅度的物质支援。请三思!不要拿自己的生命开玩笑宅家,宅家,继续宅家!坚持、坚持、再坚持!千万不要出门,人人遵守,人人转发,当前疫情仍非常严重,绝不可轻心大意,必须听党和政府的话,切记不要出门!!!【积极转发】取消封闭式管制是为了方便通行,开展生产复工,不是疫情结束,一级响应并没有解除,仍需慎重出行,减少不必要外出,严禁聚集、聚餐、聚会,敬畏生命,出门请佩戴好口罩,继续做好疫情防控工作!坚持就是胜利,等我们彻底胜利了,我们可以举国欢庆,享受风调雨顺国泰民安的幸福社会主义,享受中华民族的伟大复兴的繁荣!敬请全国人民团结一致,齐心协力,为全面取得防疫抗疫的战争胜利而奋斗!我相信,中华民族一定能够度过难关,困难是暂时的,我们一定能够克服,苦不苦想想长征两万五,累不累,想想革命的老前辈。让你在家待着,难道比你白白送命还痛苦吗?大江东去浪淘尽,数风流人物,还看今朝!支持原创,请转发您的亲人、朋友圈。
作者:李荣 来源:重庆市胎儿医学中心经历了HCG阳性时的举家欢喜,但这欢喜没持续多久,接踪而至的是长达数月的早孕呕吐,好不容易熬到NT之后,接下来又要面对的是各种纠结。纠结在哪家医院产检,纠结找专家还是普通医生。但是最让孕妈们纠结的莫过于---唐筛、无创、羊水穿刺,我该如何选择?今天,重庆市胎儿医学中心的李荣医生跟大家一一道来:首先是各种检查的优缺点唐氏筛查优缺点①优点:经济实惠(两三百块钱)、无创(只需抽取静脉血)②缺点:检出率及准确性低(就算最全面的早中期联合筛查也只能检出80-90%的患儿),假阳性率高(唐氏筛查高危的,经确诊最后很大一部分不是)。无创NDA优缺点①优点:无创(只需抽取静脉血)、检出率准确率高(能检出99%的患儿),假阳性率低(无创高危的,经确诊最后极个别不是)。②缺点:费用高(全国各地2000多---3000不等)、检测面窄(目前针对21、18、13三体准确性高,性染色体准确性稍低,其他染色体准确性有限(其他染色体异常往往也表现成唐筛高风险)。但无创的检测范围已覆盖了常见的染色体非整倍体疾病)。羊水穿刺优缺点①优点:能一次检测46条染色体,不但数目异常,>10M的结构异常也能检出。另外还能进行基因芯片及单基因疾病检测。准确性高(染色体疾病诊断的金标准)是目前检测范围最广,准确性最高的产前诊断技术之一。②缺点:有一定风险(流产率0.5-1‰),极个别的会细胞培养失败,须改做其他检查或重新穿刺。我究竟该如何选择?经济实惠型组合唐氏筛查 → 无创DNA → 羊水穿刺先做唐氏筛查:高风险或伴发其他危险因素再行无创或者羊水穿刺,此组合费用低,安全,因为无创的加入,羊水穿刺的孕妈数量会大幅减少。但此组合会漏掉约10%的唐氏患儿。适合无高危因素普通孕妈,勤俭持家型。奢华型组合无创DNA → 羊水穿刺不做唐氏筛查直接做无创DNA,无创高风险或伴发其他危险因素再行羊水穿刺,因为无创的直接应用,此组合费用高,检出率高,能检出99%唐氏患儿。此组合的瑕疵是会漏掉极少数的染色体结构异常患儿。适合无高危因素普通孕妈,奢华小资型。精确型组合高危因素 → 羊水穿刺此组合检出率最高,能检测出所有染色体的数目异常,如加做SNP基因芯片能检出染色体微缺失、微重复、杂合性缺失及单亲二倍体。特别适合那些有过异常生育史、家族史及伴发其他高危因素的孕妈。
这项技术大概是在1997年,丹尼斯.劳有一篇文章报道,母血清游离DNA发现胎儿的游离核酸,1998年开始香港丹尼斯.劳发表第一篇文章就是用于产前检测方面。非整倍体检查是21三体,之后最近几年,大概2011年和2012年这两年文章出来特别多,基本上有一个非常大的改变。 目前我国产前筛查模式采用的是胎儿染色体非整倍体的二级预防模式,所谓二级预防就是早孕期筛查、中孕期筛查。早孕期筛查包括B超NT,还有血清学的标记物AFP和β-HCG,所有的筛查结合孕妇一些基本的指标,最终计算得到一个风险值,高危的孕妇去做有创的产前诊断。 血清标记物和超声筛查的可信度,结合母亲年龄的三联筛查,对于唐氏综合症,21三体的检出率大概65%-70%,假阳性率在5%左右,在国外做的更好,他们可以做到90%以上。 我国产前筛查和诊断技术的行业标准规定三联筛查是国家最常用筛查。规定了假阳性率在5%的前提下检出率希望是达到70%,我国大部分医院最好也就能做到70%,实际是65%-70%之间,对于高危的孕妇,因为我国主要是采用中孕期的筛查,中孕期的产前筛查高危的孕妇主要是做羊水穿刺,对于高龄的孕妇,如果有可能,对于我们国家女性保健法规定对于高危的孕妇还是建议做产前诊断,我们建议在更早的时间11-13周做绒毛活检,查孩子染色体,对于各种原因错过了筛查、或者筛查低危,之后排畸B超发现有问题的我们可以选择做脐静脉的穿刺。 侵入性产前诊断的利与弊,对于侵入性产前诊断对胎儿进行染色体核型的分析是目前国际上的金标准,羊水穿刺有一定流产的风险,大家都知道,这也是孕妇最担心的,流产的风险大概是1/100,还有一个最大的问题就是报告周期时间长,在国外要求是2周必须给出报告,我们国家可能因为各种各样的原因,各式技术的原因,再就是病人标本量多的问题,可能也得一个月以上,只有少数的医院能在1个月内给出报告。病人拿到高危的筛查报告之后,精神压力非常大。所以她急于想知道结果,这也是个问题。临床诊断不足,能够有侵入性产前诊断的医院并不多,也不能满足所有的高危孕妇进行侵入性产前诊断。 目前成熟的产前诊断的技术,羊膜腔穿刺、绒毛膜活检、脐静脉穿刺。孕妇最担心的主要问题就是增加流产的风险,尤其是胎儿比较珍贵,IVF、高龄、反复流产好不容易得到一个孩子,在2006年美国做了一个大样本人群的调查,他们对35000例孕妇做了调查,其中只有3000例孕妇同意进行侵入性产前诊断,在这些做产前诊断的孕妇当中大概0.5%会发生流产。 目前产前诊断技术常用其实都是一些侵入性的操作,它不是无创的,不是非侵入性的;无创DNA无疑是孕妇的福音。,抽母亲的外周血5-8ml,可以检查胎儿染色体,21、18、13、X/Y。 无创DNA技术就是:ffDNA就是胎儿游离的DNA,几乎全部的DNA都来源于胎盘的滋养细胞,它是胎盘来源的,母体血浆中大概5%-30%是胎儿游离DNA,分娩后母体cffDNA快速降解,这个发现就是为母血浆cffDNA含量检测,用于产前筛查、产前检测是非常有利的一个证据,一个支持。因为cffDNA半衰期非常短,只有平均16分钟,2小时以后就检测不到了,它跟母血中的胎儿细胞去比,最开始这项无创的非整倍体的产前诊断。 国外做了一些对性染色体的检出率,几万例数据,认为性染色体可能不到70%,我们国家做出染色体检测率的灵敏度也就是70%。这就是无创检测目前存在的问题。 无创DNA产前检测技术用于产前筛查存在着较大优势,检测的假阳性率在0.05%-0.1%,跟目前血清的筛查相比是差的太远,有利于大大减少不必要的侵入性产前诊断,这也是它的一个优势,也就是目前人们看中这项检测的前景的一个亮点,不仅是缓解目前产前诊断所面临巨大的压力,更重要的是不必要的减少了介入性产前诊断的操作,检测的漏诊率还是比较低的,0%-1.3%,所以这项检测可以进一步提高我们国家出生缺陷的防治水平,它可以覆盖13号染色体还有性染色体。 不像血清值筛查,年龄算错了,孕周算错了,所有的危险值也不一样,无创DNA检测在国外把它定义为筛查,给的评价就是近乎于产前诊断的筛查,这是我们医生必须得了解,近乎于产前诊断不等于产前诊断,它的精确度非常高,它的阳性率非常高,但是有非常低的假阴性的比率和假阳性的比率,所以说这项检测非常好,将来非常有前景。 最近2011年和2012年大量的文章出来之后,美国从他们的国家具体的情况给了一个建议,它的定位是在高危孕妇,可以提供一个cffDNA的检测,它的检出率是98%,假阳性率是﹤0.5%,是非常低的,它认为cffDNA的检测不应常规用于产前实验室的检测,但是经过初步筛查的高危孕妇咨询时你可以给它提供一种选择,为什么他们一定是做在高危人群,首先经济上是一方面,这个检测设出来是为了检测而不是从钱的考虑,经济是一方面,美国这方面做一线筛查和二线筛查,高危的孕妇我们才去做无创,它定位在高危还有他们一线的检出率比我们做得好,他们做早孕期筛查,做四联期筛查,他们都比我们检出率好,我们自己的筛查会更担心低危人群会漏,cffDNA的检测这三条染色体和2个性染色体这5条染色体其实最常见 因为现在的筛查模式不能被无创来替代,主要是费用的问题,目前国内国际还认为cff-DNA的检测它不能代替融穿或者羊穿产前诊断,他筛查也好,检测也好毕竟不是一个诊断。 现在筛查的阳性预测值不到0.5%,也就是说做100个高危孕妇,做羊穿可能不到1%。不到1个是有问题的,这项检测如果做得好,技术能够控制的很好,可以把99挑出来,这样就非常好,这也是这项技术非常有前景的一方面!
梅毒为严重的性传播疾病之一。具有传染性强,病程复杂的特点。由于其症状不明显,且可自然消退,给临床诊断带来了困难。对其诊断必须依靠病史、症状及实验室检查综合分析,其中实验室检查结果对诊断具有决定性意义。梅毒的实验室检查主要包括血清学检查、病原体检查、核酸检查等,检验诊断程序见图4-5。 【免疫学检测】 机体感染梅毒螺旋体后,经过一定潜伏期,血清中可产生一定数量的抗类脂质抗体(非特异性的血清反应素)和抗梅毒螺旋体抗体(特异性的免疫球蛋白),用血清学试验检测患者血清中的反应素或抗体是诊断梅毒的最主要的实验室检查方法,根据检测试剂中所用抗原不同可分为两类,一类为非梅毒螺旋体抗原试验,另一类为梅毒螺旋体抗原试验。 1.非梅毒螺旋体抗原试验这类试验的抗原为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混悬液,用来检测血清中抗心磷脂抗体。此类试验为非特异性抗体检测试验,为梅毒的常规筛查试验。美国CDC认可的磷脂抗体检测实验包括VDRL、USR、RPR、TRUST. (1)研究实验室玻片试验<veneraldiseaseresearchlabo-ratorytest,VDRL):VDRL试验所用抗原是从牛心中提取心磷脂,适量加入胆固酵及卵磷脂以提高敏感性,通常称这种抗原为心磷脂抗原。梅毒螺旋体在破坏组织的过程中,体内释放一种抗原性心磷脂,它刺激机体产生反应素,这种反应素与牛心中提取的心磷脂在体外发生抗原抗体反应。 1)检测方法:有定性试验与定量试验。 2)诊断意义及评价:①可作定量及定性试验,操作简单.报告快速,费用低,并有一定的敏感性和特异性,可用于标本的初筛及作为疗效观察、随访的指标;②是唯一推荐用于检测脑脊液反应素的试验,对诊断神经梅毒具有重要价值;③某些生物学因素及某些疾病(如结缔组织病、感染性疾病等)存在时可能出现假阳性;④操作不正确或由于抗体过剩引起的前带效应,可导致假阴性反应;⑤本法对一期梅毒敏感性不高;⑥应用显微镜读取结果。 (2)不需加热血清反应素试验(unheatedserumregaintest,USR):该试验用改良的VDRL抗原,稀释后离心沉淀,于沉淀中加入二胺四乙酸二钠(EDTA)、防腐剂,并加入氯化胆碱起化学“灭活”作用。待检血清不必灭活。 1)检测方法:有定性试验和定量试验。 2)诊断意义及评价;①可作为疗效观察、随访、有否复发或再感染指征;②USR试验所用抗原是VDRL抗原的改良,敏感性及特异性与VDRL相似;③在玻片上做絮状反应,可肉眼读取结果;④血清不需加热灭活,抗原悬液可保存4个月,不需即时配制,节省操作时间。 (3)快速血浆反应环状卡片试验(rapidplasmareagincardtest,RPR):RPR是80年代问世的非特异性梅毒血清学试验,所用抗原为标准的牛心肌脂抗原,该法操作简便、快速。原理与USR试验基本相同,由于在RPR抗原中加入了活性碳颗粒.试验在特制的白色纸卡上进行,所以容易判断结果。是目前实验室最常用的梅毒筛选实验。 1)检测方法:有定性试验与定量试验。 2)诊断意义及评价:①该法操作简便、迅速,适用于大量标本检测;②灵敏度较VDRL高,特别是在早期梅毒。主要用于Ⅰ期梅毒的诊断;③结果容易判定、不需灭活、不需显微镜,抗原不需新鲜配制等;④定性试验阳性都必须做定量试验,阳性者需了解抗体效价的高低,以便监视疾病活动情况和观察疗效;⑤当抗体含量过高时,可出现“前带现象”导致阴性反应;定量试验还可排除“前带现象”;⑥某些生物学因素及某些疾病可导致生物学假阳性反应。 (4)甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST):本试验所用的抗原是从牛心提取的心磷脂和从鸡蛋黄提取的卵磷脂及胆固醇,与RPR方法比较,是在TRUST抗原中加人甲苯胺红染料颗粒代替碳颗粒作为指示物,使阳性结果出现红色絮状凝集现象。其操作方法、结果判读与检测意义与RPR相同。其缺点是许多因素可影响测定结果,如高脂血症和抗心磷脂抗体阳性患者的血清均可干扰而出现假阳性结果。而且该试验在非淋菌性尿道炎患者中存在生物学假阳性。 (5)康_华氏试验:是最早采用的梅毒血清学试验。这两种试验的抗原采自牛心肌乙醇浸液,称作心肌脂抗原。此类试验操作复杂,易出现假阳性。现已被淘汰。 2.梅毒螺旋体抗原试验此类试验采用的抗原是梅毒螺旋体,检测血清中的抗梅毒螺旋体IgM或IgG抗体,其敏感性和特异性均较高。常用的方法有梅毒螺旋体血球凝集试验、梅毒螺旋体荧光抗体吸收试验、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验、梅毒螺旋体免疫印迹试验、梅毒螺旋体制动试验等。 (1)梅毒螺旋体微量血凝试验(mierohemagglutinationassayforantibodiestoTreponemapallidumMHA-TP):是以梅毒螺旋体为抗原的间接血球凝集试验,用于检测血清中特异性梅毒螺旋体抗体,是目前国内常用的梅毒血清学确证试验。所用抗原为经超声渡处理的Nichol梅毒螺旋体提取物,再经醛化和鞣酸处理的绵羊红细胞致敏,称为致敏血球。待检血清用吸附剂处理,吸附剂是用非致病性螺旋体Reiter株经培养繁殖一定量后,高压灭菌,高速离心而得。待检血清经吸收处理后,可除去非特异性螺旋体抗体。 诊断意义及评价:①TPHA的敏感性和特异性均较高?是梅毒的权威性诊断方法;②操作简单,血清血浆均可检测,结果清晰易判断;③该试验一旦阳性,约95%患者终身不转阴,因此该试验阳性只能说明患过梅毒,不能作为疗效观察及随访指征;④试剂成本较高,结果判断难以自动化。 (2)梅毒螺旋体荧光抗体吸收试验(fluoresceneetrepo-nemaantibodyabsorptiontest,FTA-ABS):该法以密螺旋体无毒株(Reiter株)抗原吸收待检血清,排除同属抗原的交叉结合,保证了试验结果的特异性;以整条梅毒螺旋体检测血清中抗体,确保各种抗原分子的完整存在,提高了试验的敏感性。美国常采用此试验作为梅毒的确认试验。 诊断意义及评价:①FTA-ABS具有特异性高、敏感性较强的特点,被认为是检测梅毒的“金标准”;②该试验一旦阳性,约95%患者终身不转阴,因此该指标阳性只能说明患过梅毒,不能作为疗效观察及随访指标;③需有优质的荧光显微镜和技术熟练的操作人员,试验结果判定常带有主观色彩。不作为梅毒诊断的首选方法;④血清标本陈旧与污染、操作不准确等可引起的假阳性;⑤红斑性狼疮、麻风、类风湿性关节炎、混合结缔组织病、海洛因成瘾等可引起假阳性反应。 (3)梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmu-nosorbentassay,TPELISA):是近年来随着梅毒螺旋体基因工程抗原的研制成功而建立的方法。该法用双抗原夹心法测定梅毒特异性抗体,主要检测梅毒螺旋体IgG和IgM抗体,国内外的研究也表明,TP-ELISA和TPHA、FTA-ABS等有良好的相关性。该法操作简便,不受样品中纤维蛋白(原)和溶血等影响,一次可进行多份样品的检测,用酶标仪分析,客观准确,结果便于保留及标准化管理,可用作筛查和确认试验。因此,TP-ELISA方法被公认为梅毒血清学诊断实验的首选方法。 1)检测方法:利用间接法ELISA的原理,把抗人IgG或IgM单克隆抗体包埋在微量滴定板或其它固相载体上,加人待检血清以捕捉其中的IgG或IgM,再先后加人超声粉碎或基因重组获得的梅毒螺旋体抗原、生物素标记的抗梅毒螺旋体单克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的亲和素及底物,最后通过显色判定结果。 2)诊断意义及评价:①可以测IgG和IgM抗体,是对早期梅毒、胎传梅毒诊断有重要意义;②ELISA方法易自动化,适用于大量标本的检测。 (4)梅毒螺旋体免疫印迹试验(westernimmunoblottingtechnique):是20世纪80年代发展起来的一种检测技术。该试验通过转移电泳制备的硝酸纤维膜条上含有梅毒螺旋体的蛋白以确认是否梅毒感染。 诊断意义及评价:①免疫印迹法结合了免疫学和分子生物学的特点,敏感性高,特异性强;②该法操作简便,对试验仪器和环境的要求不高,结果容易判定,但成本较高;③是早期梅毒、胎传梅毒和疗效观察的十分敏感和特异的方法。 (5)梅毒螺旋体制动试验(treponemapallidumimmobi-lization,TPI):用活的Nichol株螺旋体加患者血清(含抗体)后,在补体的参与下可抑制螺旋体的活动。如≥50%梅毒螺旋体停止活动,则为阳性。此试验特异性、敏感性均高,但设备要求高,操作难,仅供研究用。 3.梅毒血清学试验的应用评价 (1)非梅毒螺旋体抗原试验应用价值:①适用于常规检查及大量人群筛选;②定量试验可监测疾病活动情况和观察治疗效果,辅助判断是否复发与再感染;③鉴别早期梅毒与晚期潜伏梅毒,先天梅毒与被动反应素血症;④脑脊液作VDRL试验,有助于神经梅毒的诊断;⑤非梅毒螺旋体抗原试验阳性者,要用梅毒螺旋体抗原试验确认。 (2)梅毒螺旋体抗原试验应用价值:①用活的或死的梅毒螺旋体或其成分作抗原测定抗螺旋体抗体。这种试验敏感性和特异性均高,一般用作证实试验。②即使患者经过足够的抗梅毒治疗,此类血清学反应仍可保持阳性,甚至保持终生,因此,不能用于观察疗效。 (3)血清中抗梅毒螺旋体IgM型抗体检测:血清中的抗梅毒螺旋体IgG抗体,即使是患者经过足够治疗后,仍能长期存在,甚至终身不消失。血清反应持续阳性,只能作为流行病学检测。血清中的抗梅毒螺旋体IgM抗体是早期梅毒、活动性梅毒、再染性梅毒的标志,可用来监测病情,指导治疗和判断愈后,并可以诊断先天梅毒和活动性神经梅毒。 (4)梅毒血清反应的假阳性:①急性生物学假阳性:一般出现于非螺旋体抗原血清试验,见于麻疹,水痘、风疹、传染性单核细胞增多症、上呼吸道感染、猩红热、亚急性细菌性心内膜炎、肺炎链球菌性肺炎、活动性肺结核、丝虫病、斑疹伤寒、锥虫病、回归热、钩端螺旋体、疟疾等,但滴度较低,一般在1:8以下。往往在6个月内转阴;②慢性生物学假阳性:可持续6个月以上或数年,甚至终身。多数出现于非螺旋体抗原血清试验假阳性,常见于系统性红斑狼疮、播散性盘状红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血、进行性系统性硬化症、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病,滴度可达1:64~1:128;少数孕妇、正常人群假阳性率为1%~2%。在70岁以上高龄老人中有1%出现假阳性。螺旋体抗原血清假阳性发生率比非螺旋体抗原血清试验少,少数患者出现FTA—ABS假阳性,其荧光染色常很弱或呈不典型的“串珠状”;③技术性假阳性:可能的原因为抗原敏感性过高,血清标本弄错或溶血或细菌污染,工作人员的技术不熟练等。技术性误差引起的假阳性,应排除可能存在的干扰因素,重新检测。 (5)梅毒血清反应假阴性可能的原因是:①一期梅毒硬下疳,一般硬下疳出现2~3周,机体才出现反应素,故早期血清反应常呈阴性;②感染梅毒后立即治疗或晚期梅毒,由于血清反应素低,出现阴性;③二期梅毒假阴性:这是血清中抗心磷脂抗体过多,抑制阳性反应的结果。即前带现象(prozonephenomenon);④技术操作或抗原敏感性低出现血清试验阴性。 【微生物学检测】 1.梅毒病原体的检测梅毒螺旋体一般染料不易着色,常采用镀银染色、荧光染色后检测。用暗视野显微镜也可从病变标本中直接观察到梅毒螺旋体。 (1)暗视野显微镜检查梅毒螺旋体(DF):暗视野显微镜检查采用一个特殊的聚光器,其中央为黑色遮光板所遮蔽,光线不能直接通向镜筒,仅可从其四周边缘斜射到载玻片上。如该斜射光线遇到载玻片上的细菌、螺旋体等,由于菌体和周围液体折光率不同,物体在暗视野内由于折射显现发光。暗视野显微镜检查是梅毒病原体检测的主要方法之一,可直接观察到病灶分泌物中的梅毒螺旋体,结合临床症状可直接诊断梅毒。 1)标本采集和处理:①皮肤黏膜损害:先在载玻片上放1~2滴9g/L氯化钠溶液。另用棉拭子蘸取无菌9g/L氯化钠溶液轻轻擦尽皮损上的污物(如皮损上有痂皮,可用钝刀轻轻除去),用手挤压皮损周围,使组织浆液渗出,用钝刀轻轻刮取数次(避免出血),取渗液混入载玻片上9g/L氯化钠溶液中,加盖玻片后置暗视野显微镜下检查;②淋巴结:消毒淋巴结表面的皮肤,用1ml无菌注射器吸取无菌9g/L氯化钠溶液0.25~0.50ml,无菌操作穿刺淋巴结并注人9g/L氯化钠溶液,再吸人注射器内。如此反复2~3次后,取少量的淋巴液直接滴于载玻片上,加盖玻片,置暗视野显微镜检查;③羊水:梅毒孕妇的羊膜穿刺术应由专业人员操作,获得羊水直接滴于载玻片上,加盖玻片,置暗视野显微镜检查。 2)检测方法:将显微镜聚光器换上暗视野聚光器,将标本置载物台上,先用10倍物镜,再用40倍物镜观察。调整聚光器的高度要适中,使物像清晰为度。暗视野显微镜下,螺旋体呈纤细螺旋状,长约5~20μm,有6~12个螺旋。见到运动活泼的螺旋体即为阳性。 3)诊断意义及评价:①该方法不仅操作简单,且经济、快速,阳性结果可以确诊梅毒,阴性结果不能完全除外梅毒;②对有皮肤黏膜损害和淋巴结病变的一期、二期梅毒的诊断具有重要价值,适用于早期梅毒的诊断;③羊水检查对先天性梅毒诊断有重要价值;④用药、取材不当等较多因素可影响检查结果;⑤此法不适用于晚期及隐性梅毒或口腔、肛周等部位标本的检测。 (2)免疫荧光染色法:含梅毒螺旋体抗体血清,加非致病性螺旋体培养物进行吸收,再与异硫氰酸荧光素(HTC)相结合,梅毒螺旋体在荧光显微镜下呈绿色荧光,易于观察。 1)检测方法:分直接免疫荧光法和间接免疫荧光法。 2)诊断意义及评价:①免疫荧光法的诊断价值与暗视野显微镜检查法相似。灵敏性稍高于暗视野检查;②免疫荧光抗体法检查既可以检测皮损分泌物,又可以检测新鲜或甲醛固定组织中的梅毒螺旋体;③免疫荧光抗体法阳性结果可确诊为梅毒,阴性结果不能完全除外梅毒,因为标本、FITC、抗血清质量以及操作技术等方面的影响均可能导致假阴性结果;④可用于口腔、肛周等部位标本中梅毒螺旋体的检测。 (3)螺旋体镀银染色法:螺旋体具有亲银性。硝酸银可使之染成棕黑色。 1)检测方法:取材、涂片后在空气中自然干燥,罗吉固定液固定1~2分钟,无水乙醇洗涤,滴媒染液2~3滴,用乙醇灯微加热至产生热蒸汽为止,染30秒后水洗,最后滴加银染液并加热产生蒸汽,染30秒后水洗,自然干燥后置油镜下镜检。背景为淡棕色,螺旋体被染成棕黑色。 2)诊断意义及评价:①阳性结果结合典型的皮肤黏膜损害可确诊梅毒,但阴性结果不能完全除外梅毒;②有时某些腐生螺旋体亦呈假阳性反应;③该法适用于缺乏暗视野显微镜的基层单位直接检查梅毒螺旋体。 (4)多功能显微诊断仪(multifunctionmicroscopydiagnosticinstrument,MDI):是近年发展的一种综合相差对比、暗视野及偏振光的可变投影显微镜,待检标本不需染色及任何加工处理,而是将“活的”真实的样品直接进行观察,具有直接、方便、快速的优点。但整套仪器价格昂贵.很难普及到各个梅毒检测实验室。 2.基因诊断技术检测梅毒螺旋体不能进行体外培养,血清学诊断对确定感染及治疗很有意义。但对早期梅毒诊断不敏感,对先天性及神经性梅毒的诊断不够特异。随着基因诊断技术的发展,PCR技术应用于检测梅毒螺旋体DNA,特异性强,敏感性高,是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。 (1)标本采集和处理:可采集局部分泌物、淋巴结液、羊求、血清、脑脊液等标本,用煮沸或低速离心或碱裂解等方法从标本中提取DNA模板。 (2)检测方法:PCR检测梅毒螺旋体时,一般使用梅毒螺旋体47kD膜抗原基因(tpp47基因),39kD碱性膜蛋白基因(bmp基因),TpF1蛋白基因(tpf-1)或TyF1蛋白基因(tyf-1)和tmpA基因,PCR扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色进行鉴定。 (3)诊断意义及评价 1)敏感性和特异性较高:尤其对无临床表现、血清学为阴性的可疑梅毒、神经性梅毒、胎传梅毒等具有较好的辅助诊断价值。 2)不能区分恬的和死的螺旋体,一般不用于梅毒治疗后的复查。但死亡的梅毒螺旋体经15~30天即从机体内清除,故治疗数周后PCR阳性意昧着持续感染的可能。 3.脑脊液检查晚期梅毒患者,当出现神经症状时.要进行脑脊液检查.以诊断或排除神经梅毒。 (1)细胞计数:脑脊液白细胞计数也常常是判断疗效的敏感指标。当有活动的神经梅毒存在时,脑脊液白细胞计数常增高,WBC>5/μl。 (2)蛋白测定:神经梅毒时,脑脊液总蛋白量增加此为非特异性变化。 (3)VDRL试验:为诊断神经梅毒的可靠诊断依据。 (4)脑脊液PCR检测:可快速准确诊断神经性梅毒。 4.梅毒螺旋体培养梅毒螺旋体人工培养较困难,且易失去毒力。利用家兔对梅毒螺旋体的易感性,把梅毒螺旋体注射于白兔睾丸内,观察有无感染迹象,是经典的梅毒诊断方法。但由于费用高、检查时间长等原因不能应用于临床,目前仅用于科研或保存梅毒螺旋体。 【检验诊断综合评价】 梅毒的诊断主要取决于血清学试验。及早、准确地诊断梅毒需要梅毒实验室的检测,选择敏感性和特异性均高的检测方法非常重要。目前,梅毒的血清学诊断包括初筛试验和确认斌验。初筛试验主要是性病研究实验室应用性病实验研究试验(VDRL)、快速血浆反应素(RPR、VDRLRPR和TRUST)试验。此类试验操作简单,敏感性高,但可出现假阳性,一般作为筛选试验,进行梅毒的常规筛查及疗效观察、判断复发及再感染。但存在假阳性和假阴性。假阳性主要是自身免疫性疾病、传染性疾病和妊娠等等因素所致,假阴性主要是早期,晚期梅毒以及前带现象。因此,在梅毒筛查试验时,应同时进行原样和1:2滴度稀释检查。确诊试验包括血清荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、血凝试验(TPHA)、明胶颗粒凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹试验和梅毒螺旋体制动试验(TPI)等用于特异性IgM、IgG检查。初步临床研究表明,特异性IgM可用于诊断新生儿(先天性)梅毒诊断。其他试验一般作为血清学试验的完善和补充。近年来,也可用PCR技术检测苍白亚种螺旋体的特异DNA片断,或用免疫印迹法测定与苍白亚种螺旋体特异抗原组分发生反应的特异性抗体。
去年网络上的一篇文章“华大癌变”引起很大的风波,也让无创胎儿DNA检测(NIPT)上了无数的头条。很多人对无创DNA开始怀疑,说这个不准确,所以很多人去做羊水穿刺,那么羊水穿刺和无创DNA到底怎么选择,我再次给大家科普一下:无创DNA筛查的是什么,不能筛查又是什么?和唐氏筛查大致一样,唐氏筛查的是21三体、18三体和开放神经管畸三种的风险,无创DNA筛查的是21三体、18三体、13三体,不包括其他的染色体异常,这是因为这三种染色体三体发病率比较高。无创DNA不对开放神经管畸形进行检查。一般开放神经管畸形是通过彩超筛查的。这一点要记住。每一项检查都有适应证,无创DNA的适应症是下列情况根据中国的法律法规和国际上的文献和通行做法制订的NIPT的适应人群,相对适应人群和不适应人群。适应人群□唐氏筛查提示染色体非整倍体风险在1/270~1/1000之间的孕妇。□超声发现胎儿有这种异常情况:如心室强光点、肾盂分离、侧脑室轻度增宽、肠回声增强、脉络膜囊肿等。□有羊水穿刺禁忌证者(先兆流产、发热、出血倾向、感染未愈等)。□就诊时的孕周超过21周,错过血清学筛查最佳时间,或错过常规产前诊断时机,但要求降低21三体综合征、18三体综合征及13三体综合征风险的孕妇。□珍贵儿妊娠,知情后拒绝介入性产前诊断的孕妇。□ 对介入性产前诊断极度焦虑的孕妇。□无法预约到产前诊断的孕妇。相对适应人群□ 大于等于35岁-小于40岁的孕妇,拒绝羊水穿刺有创检查的。□健康年轻孕妇(年龄小于35岁,无不良产史)唐氏筛查风险在1/270-1/50之间者。□孕周小于12周的孕妇。□高体重的孕妇(体重大于等于100公斤者)。□通过体外受精-胚胎移植方式受孕(IVF)的孕妇。□双胎妊娠的孕妇。□合并恶性肿瘤的孕妇。不适应人群□唐氏筛查高危值大于等于1/50者。□孕妇年龄大于等于40岁者。□产前超声检测发现胎儿异常的孕妇,包括早孕颈项透明层厚度(NT)大于等于3.5mm,早中孕超声发现任何胎儿大结构异常,羊水量的异常,严重的胎儿宫内生长发育异常等。□三胎及以上妊娠者(注:双胞胎目前累积数据量有限,需检测者要事先充分知情同意,到胎儿医学部咨询)。□染色体异常胎儿分娩史,夫妇双方之一有明确染色体结构或数目异常的孕妇。□胎儿疑有其他(除21、18、13三体综合征以外)染色体数目及染色体结构异常,或染色体微缺失/重复及单基因病的孕妇。□一年内接受过异体输血、移植手术、干细胞治疗、免疫治疗的孕妇。无创DNA是通过采集孕妇外周血(5ml以上),提取游离DNA,采用新一代高通量测序结合生物信息分析,得出胎儿患染色体非整倍体疾病的风险率,对于21三体综合征的检出率达99%以上,12孕周以上均可进行检测,最佳检测孕周为12-22+6周。1、该方法不适宜检测:染色体中的嵌合体型、易位型、微缺失、微重复等结构性异常;怀有多胞胎的孕妇;孕妇本人为染色体非整倍体疾病患者;孕妇接受过异体输血、移植手术、干细胞治疗、免疫治疗等。2、该检测可在孕12周开始进行,鉴于当前医学检测技术水平的限制和孕妇个体差异等不同原因,即使在检测人员已经履行了工作职责和操作规程的前提下,仍有可能出现假阳性或假阴性。如果孕妇孕周推测不准,或孕周过小(实际孕周<12周),可能影响检测结果的准确性。3、该检测仅针对21三体综合征、18三体综合征和13三体综合征三种染色体疾病。4、胎盘嵌合、孕妇自身染色体异常患者等可能造成假阳性或假阴性结果。5、由于不可抗拒因素所致样品损耗或出现特殊原因(如因个体差异血浆中胎儿游离DNA含量过低),为保证检测结果准确性,受检者须配合再次抽血取样。检测周期须从重抽血之日起延长数个工作日。6、该检测结果仅供临床参考,不能作为诊断的依据。对患者的临床诊断应结合临床金标准方法(染色体核型分析等)以及其症状/体征、病史、其他实验室检查等情况综合考虑。无创DNA与唐氏筛查的比较原国家卫计委2016年制订的“孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断技术规范”中提出,无创DNA技术对21三体的检出率不低于95%,对18三体的检出率不低于85%,对13三体的检出率不低于70%。现实的情况是,绝大多数的检测机构的检出率都高于这些最基本的要求。通常情况下,唐氏(21三体)筛查对21三体的检出率为60%-75%,筛查阳性率为5%,阳性预测值为2%。 无创DNA技术对21三体的检出率为99%,筛查阳性率为0.2%,阳性预测值为50%-80%。(标红很重要)与血清学指标和超声软指标相比,无创DNA技术是非常好的筛查手段,检出率高,漏诊率低,筛查阳性率低,可以大大减少羊膜腔穿刺的数量。中孕期三联唐氏筛查的人,每100人当中大约有5个人是高风险,需要做羊膜腔穿刺。每100个穿刺的人当中,只有大约2个人是有染色体异常,也就是说有98个胎儿染色体正常的人是要陪着做羊膜腔穿刺的。而做无创DNA技术的人,每100人当中只有0.2个人是高风险,需要做羊膜腔穿刺,每100个穿刺的人当中,有50-80个人是有染色体异常的,也就是说只有20-50个胎儿染色体正常的人是要陪着做羊膜腔穿刺的。这样说来,大家应该能够明白了吧,选择羊水穿刺还是无创DNA不用那么纠结了吧!有的聪明人就发现其中的问题,既然唐氏筛查这么不靠谱,干嘛不直接取消而直接选择无创DNA,这个问题提的尖锐,其实,就是一个钱字。出于卫生经济学的考虑,中孕期三联血清学筛查的费用在150-300元之间,NIPT的收费在1500-2500元之间。卫生经济学考虑的是总费用,也就是说在整个人群中筛出一个21三体的平均成本,不是技术的先进性。如果NIPT的价格降低到一定的水平,筛出一个21三体的平均成本低于中孕期三联血清学筛查费用的时候,就应该把它作为一线筛查方案全面推广了。现在全国已经有好几个发达的地方把唐氏筛查换成无创DNA了。等大家经济再好一些,就不纠结了,直接做无创DNA,如果风险高就做羊水穿刺。想必这个时间不会太长,毕竟广州深圳等地方已经这样了。纠结还不是因为一个字:“穷”。
最新数据显示,2015 年我国新发恶性肿瘤病例约392.9万例,死亡病例约233.8万[1],我国肿瘤患者整体 5 年生存率为 40.5%[2], 是我国居民第一死亡原因。而同期在美国,肿瘤患者5年生
胎心出现了,再发生胎停,是为什么呢?一个种子成长成一棵大树,需要优秀的种子、土壤和水肥,还要防止病虫害。所以,胎心出现了,再发生胎停,主要有以下的几种主要原因:1.土壤不够肥沃:子宫内膜就是种子发育的温床,内膜不好,就会导致种子不能生根发芽,或者生根发芽了不能成活,这就是胎停。子宫内膜的生长需要雌激素的足够分泌,来维持内膜这个土壤的正常环境。种子的根系就是胚胎的绒毛,须根发育的时候就会分泌hcg。所以hcg的高低反映了绒毛的发育。如果HCG值不够高,说明这颗树根很小,就像沙漠里的树,那树就长不成大树,容易在生长过程中枯死,所以茂盛的树根是树能长成大树的基本条件。怀孕也一样,胎心胎芽出现了,但绒毛长的不旺盛,等胎儿继续生长了,还是容易胎停。看绒毛长的是否旺盛,主要看HCG的值。正常妊娠在妊娠70天前,HCG应该达到10万或更高。如果HCG太低,就会胎停,根据最近几年的经验,很多胎心胎芽出现,但HCG只有1-2万的最终还是会胎停。在保胎的病历中最低胎儿能到足月的是HCG达到5万。所以,对有过胎停病史的孕妇,除了B超看胎心是否出现,一般还要监测HCG的上升情况。如果HCG上升缓慢,及时寻找原因,尽力治疗。因为,树根从种子种下来就开始生长,在树根生长的过程是治疗的最佳时间,如果到了停经50-60天,绒毛生长都完成了,这时候如果发现HCG低,再治疗的效果就会差。所以对于于有复发性流产的患者,一般孕前来查原因,怀孕后要马上干预,所以,一般建议复发性患者在知道怀孕后当天或第二天就来就诊。早孕期至少一周两次的HCG监测。2.子宫动脉血流供应非常差(水肥供给不足)如果胎心出现了,HCG也能达10万左右,但如果子宫动脉血流供应非常差,也容易胎停。就像农民伯伯种树,芽长出来了,不浇水,芽也会枯萎掉。所以,有胎停史的孕妇我们一般会在备孕时和怀孕后做胎心B超的时候同时做个子宫动脉的阻力指数,如果子宫动脉缺如或倒置,要及时干预。至少用阿司匹林和达肝素来治疗,如果能够找到引起动脉缺如的免疫凝血因素,还会加免疫药物。3.胚胎质量不好(种子品质太差)胚胎质量不好也是高龄女性发生胚胎停育最重要的原因。精子和卵子在相遇的过程中可能会出现各种装配的失误。大的错误表现为生化妊娠,中等大小的错误,如三倍体 69XXY,可在没有胎心的时候就出现流产,单条染色体的三体,如16三体、12三体等,可在出现胎心后发生胎停。更小的染色体异常,比如21三体、18三体,胎儿能在宫内存活到足月,所以需要唐氏筛查来把她们抓出来。胚胎质量不好的胎停我们不值得心痛,优胜劣汰。但要知道是不是胚胎质量问题,那需要胚胎绒毛送染色体检查。4、胚胎遭遇病虫害(射线、病毒、病菌感染) 感冒发烧就有可能导致胚胎被病毒细菌杀死而导致胎停育。因此孕期要避免感冒、用药物等。由此可见,有胎心胎芽也不能避免胎停育的发生,发生胎停育原因复杂,单次胎停育有可能是胚胎自身原因或偶然因素,这情况下可再次试孕,如反复出现胎停则应该进行全面系统检查,明确胎停原因。建议各位女性朋友尽量在生育最佳年龄生育,平时也要养成良好的生活习惯,注意健康饮食,对于高龄二胎,需理性对待。